Charbon actif : est une sorte d’adsorbant non polaire plus utilisé. Généralement, il doit être lavé avec de l'acide chlorhydrique dilué, suivi d'éthanol, puis lavé à l'eau. Après séchage à 80 ℃, il peut être utilisé pour la chromatographie sur colonne. Le charbon actif granulaire est le meilleur choix pour la chromatographie sur colonne. S'il s'agit d'une fine poudre de charbon actif, il est nécessaire d'ajouter une quantité appropriée de diatomite comme aide au filtrage, afin d'éviter un débit trop lent.
Le charbon actif est un adsorbant non polaire. Son adsorption est opposée à celle du gel de silice et de l'alumine. Il possède une forte affinité pour les substances non polaires. Il a la capacité d’adsorption la plus forte en solution aqueuse et la plus faible en solvant organique. Par conséquent, la capacité d’élution de l’eau est la plus faible et le solvant organique est plus fort. Lorsque la substance adsorbée est éluée du charbon actif, la polarité du solvant diminue, la capacité d'adsorption du soluté sur le charbon actif diminue et la capacité d'élution de l'éluant est améliorée. Des composants hydrosolubles, tels que des acides aminés, des sucres et des glycosides, ont été isolés.